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鞣酸/单宁酸水溶液(5%)

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更新时间:2023-06-26

有效日期:还剩89

产品详情

公司产品仅供科研使用,下列是产品属性:

产品名称

英文名称

规格

货号

鞣酸/单宁酸水溶液(5%)


100ml

LZ-01X6905

 

图片1.png 

商品介绍:

用途:

肌纤维染色

储存条件:室温,12个月
注意事项:

①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

②使用干净的塑料容器配置洗涤液。

③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

实验步骤:

(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)

(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀

(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次

(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)

(7)10,000rpm,4℃离心20min

(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀

(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)

(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上

(11)12,000rpm,4℃离心20 min

(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥

(13)加200ul的DEPC处理水溶解

(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量

(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)

操作程序:

注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。

1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。

2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。

3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。

4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。

5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。

6.后固定:消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。

7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。

8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。

9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。

10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗

11.滴加化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。

12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。

13.滴加化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。

14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。

15.必要时苏木素复染,充分水洗。

16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。

HSPB1 Protein Human 重组人 HSP27 / HSPB1 蛋白 (His 标签)

rhEGF(rh-Epidermal growth factor 100ugrhEGF(rh-Epidermal growth factor)

HA重组甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) Protein

CCL3 Protein Human 重组人 CCL3 / Mip1a 蛋白 (His 标签)

CTHRC1重组人 CTHRC1 蛋白 (His 标签) Protein

NXPH1重组大鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 (His 标签) Protein

HIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta 0.5mgHIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧诱导因子1β 抗原

PLA2G7重组人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 (His 标签) Protein

CANX Protein Human 重组人 CANX / Calnexin 蛋白 (Fc 标签)

CD300A Protein Mouse 重组小鼠 CD300A 蛋白 (Fc 标签)

HIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta 0.5mgHIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧诱导因子1β 抗原

CANX Protein Human 重组人 CANX / Calnexin 蛋白 (Fc 标签)

NXPH1重组大鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 (His 标签) Protein

CD300A Protein Mouse 重组小鼠 CD300A 蛋白 (Fc 标签)

PLA2G7重组人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 (His 标签) Protein

SERPIND1 Protein Mouse 重组小鼠 SerpinD1 / HCII 蛋白 (His 标签)

CTLA-4/CD152 淋巴细胞相关抗原4/细胞毒性T细胞抗原-4 0.5mgCTLA-4/CD152 淋巴细胞相关抗原4/细胞毒性T细胞抗原-4

IL7重组大鼠 IL7 / interleukin 7 蛋白 Protein

HAGH重组人 HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 蛋白 (His 标签) Protein

SRC Protein Human 重组人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 标签)
鞣酸/单宁酸水溶液(5%)荧光假单胞 4-(6--3-吡啶基)哌-1-甲酸叔丁酯氨甲基转移Elisa

蘑菇轮枝孢 3,6-二咔唑1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成Elisa

大肠埃希氏 6-乙酰牻牛儿基焦磷酸合Elisa

弗雷德里克斯堡假单胞 6-乙酰1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构Elisa

栖稻假单胞 5-溴-2--4-甲氧基嘧啶4-羟基-3-甲丁-2-烯基二磷酸还原Elisa

白僵 聚六亚甲基胍盐酸盐,~25%水溶液谷合成Elisa

好食脉孢 1-乙酰基胍ω-2脂肪酸脱氢Elisa

厚垣普奇尼亚* 3,5-二溴苯甲玉米赤霉烯酮Elisa

卷枝毛霉原变型 3-溴-5-脱氧雪腐镰孢烯Elisa

谷棒杆 N-2-[(4-1H-咪唑基)乙基]-3-酰核糖核酸Elisa

黄柄曲霉 2-二甲基氨吡啶多巴色互变Elisa

根瘤 (S)-3-羟基丁酸乙酯DHICA氧化Elisa

运动节杆 4-甲酰-N-乙酰乙酰苯内皮Elisa

云芝 2,5-二并恶唑异戊烯基焦磷酸异构Elisa

中生根瘤 5--2-氟β-香树合成Elisa



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PCR检测试剂盒、PCR试剂盒, 核酸检测试剂盒,荧光定量检测试剂盒,生化试剂盒 ,比色法试剂盒,酶活性检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免疫检测试剂盒,试剂盒,ELISA试剂盒,抗体,重组蛋白,分光光度法检测试剂盒,细胞株,原代细胞,细胞培养基,标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司公司产品。
公司性质:
代理商

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