产品详情
商品介绍:
用途: 碱性磷酸酶染色与过雪夫试剂合用,同时显色碱性磷酸酶和PAS阳性物质。 注意事项: 适用于冰冻切片、石蜡切片,碱性磷酸酶活性部位呈黑色,PAS阳性物质呈紫红色。染色过程中注意控制过处理的时间,否则容易褪色。 储存条件:4℃,避光,6个月 |
中文名称:碱性磷酸酶-PAS联合染色液
英文名称:
产品规格:6×50ml
产品货号:LZ-01X6932
发货周期:1~3天
公司产品现货供应,质量有保证、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
EFNA5 Protein Human 重组人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)
PTEN/MMAC1 一种抑制基因抗原 0.5mgPTEN/MMAC1 一种抑制基因抗原
NS2重组甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2 Protein
CECR1 Protein Human 重组人 CECR1 / ADA2 蛋白 (His 标签)
FCGR2A重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 标签) Protein
NTRK1重组大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 标签) Protein
DR3/TRAMP (death receptor-3 0.5mgDR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受体(抗原)
CTNNB1重组人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 标签)
CD36 Protein Mouse 重组小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 (His 标签)
DR3/TRAMP (death receptor-3 0.5mgDR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受体(抗原)
CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 标签)
NTRK1重组大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 标签) Protein
CD36 Protein Mouse 重组小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 (His 标签)
CTNNB1重组人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 标签) Protein
SELPLG Protein Mouse 重组小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 蛋白 (Fc 标签)
HSP-27(Heat Shock Protein 27 0.5mgHSP-27(Heat Shock Protein 27) 热休克蛋白-27(抗原)
食蟹猴
COL2A1重组人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 标签) Protein
SCN2B Protein Human 重组人 SCN2B 蛋白 (Fc 标签)
碱性磷酸酶-PAS联合染色液异常毕赤酵母 2-巯基-5-苯并噻唑山梨脱氢Elisa
枯草芽孢杆 4--2-溴苯盐还原Elisa
蜡状芽孢杆 4--2-氟苯腺苷酸环化1Elisa
芽胞杆 O-甲基异脲盐酸盐乙酰羧化1Elisa
噬几丁质属 2--5-木质合成Elisa
湖泊黄杆 2,6-二溴对-O-甲基转移Elisa
侧孢短小芽胞杆 2,7-二芴-4-环氧乙烷尼克酰Elisa
少根根霉 4-苯甲酰乙酸甲酯芳樟合成Elisa
拟土黄红菇 2-甲氧基-4-香叶合成Elisa
十字斯氏格孢 2-溴-5-氨肽Elisa
澳型核果褐腐病 2-甲氧基-6-25-羟胆钙化Elisa
蓖麻炭疽盘孢 6-甲氧基异喹啉线粒体异柠檬酸脱氢Elisa
漏斗状侧耳(凤尾菇) 烯氧基苯硫色脱羧Elisa
大肠埃希 4,6-二羟基-1,3-间苯二甲酸甲酯羟基-O-甲基转移Elisa
小环绵盘 2--5-溴5-羟色-N-乙酰转移Elisa
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