肌纤维ATPase染色液

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中文名称：肌纤维ATPase染色液

英文名称：
产品规格：4×50ml

产品货号：LZ-01X6942

发货周期：1～3天

商品介绍：

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

EPCAM Protein Human 重组人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 标签)

PS-1(NT 0.5mgPS-1(NT)，Presennillin-1(S182) 早老素蛋白-1(抗原)

NA重组甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 标签) Protein

AKR1C4 Protein Human 重组人 AKR1C4 蛋白 (His 标签)

IL18RAP重组人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (His 标签) Protein

CALM2重组人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 标签) Protein

Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物质受体(抗原)

SERPINA7重组人 SerpinA7 / TBG 蛋白 (His 标签) Protein

CCL2 Protein Human 重组人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 (His 标签)

TIMP1 Protein Human 重组人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白 (His 标签)

Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物质受体(抗原)

CCL2 Protein Human 重组人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 (His 标签)

CALM2重组人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 标签) Protein

TIMP1 Protein Human 重组人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白 (His 标签)

SERPINA7重组人 SerpinA7 / TBG 蛋白 (His 标签) Protein

SELL Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (His 标签)

蛋白二硫键异构酶(PDI)重组蛋白 Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI)

APOA1重组小鼠 ApoA1 蛋白 (His 标签) Protein

RPRD1B重组人 RPRD1B 蛋白 (His 标签) Protein

IFNL1 Protein Human 重组人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 (His 标签)
肌纤维ATPase染色液类马链球 硫代烟酰Ⅱ型胶原Elisa

桃中田壳小圆孢 4H-噻吩[3,2-b]吡咯-5-羧酸乙酯Ⅲ型胶原Elisa

类干酪乳杆 2,4-二Ⅲ型前胶原端肽Elisa

抗生链霉 3--4-溴甲酯Ⅳ型胶原Elisa

荧光假单胞 3,6-二甲氧基哒Ⅶ型胶原Elisa

出芽短梗霉 7-羟基-6-甲氧基-3,4-二氢异喹啉adropin蛋白Elisa

香菇 苯并咪唑-4-羧酸ATP结合盒转运体A1Elisa

三隔镰刀 4--2-甲酯ATP结合盒转运体G1Elisa

天格尔黄杆 5-羧酸嘧啶ATPElisa

柑橘藻斑病* 二氟甲氧基苯Bcl-2相关X蛋白Elisa

纺锤形赖芽孢杆 三氟磺基苯B活化因子Elisa

空泡单胞 5-基-2-噻吩甲酸B瘤-XLElisa

衣芽孢杆 2-氟-5-硝基吡啶B瘤因子2Elisa

食蔗糖葡糖酸醋杆 2-基-4-氟苯乙酮盐酸盐cAMP反应元件结合蛋白Elisa

酿酒酵母 3--4-氟CC趋化因子受体6Elisa

注意事项：

1、本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

3、禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。

7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融，否则将会增加空白吸收，从而影响检测结果。最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。

8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性，则测定不含细胞，仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入 MTS ，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。

9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，对于大多数情况孵育 1 小时即可，白细胞需要培养较长时间。

11、如果不是使用 96 孔板检测，MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。