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小鼠脐静脉平滑肌细胞

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更新时间:2022-09-23

有效日期:还剩355

产品详情

我司全程提供细胞生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、组织、冻存条件等复苏及冻存细胞株说明书信息,我们专业您的细胞系实验,让您实验再无烦扰!产品仅用于科研

产品名称

规格

分类

货号

小鼠脐静脉平滑肌细胞

5×10Cells/T25培养瓶

原代细胞

BJ-X97670

商品介绍:
名称   小鼠脐静脉平滑肌细胞
2.组织来源:脐带组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

小鼠脐静脉平滑肌细胞分离自脐带组织;它是脐静脉的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构,脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO2O2,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘,脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。血管平滑肌是许多重大血管疾病的细胞基础;血管平滑肌细胞的异常增加的生长潜力在血管疾病发生过程中起决定作用。由于脐带是分娩过程中的废弃物,同时从脐带中分离人脐静脉平滑肌细胞方法相对成熟,使得体外培养的脐静脉平滑肌细胞作为研究血管的模型细胞。脐静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。

5.方法简介:

公司实验室分离的小鼠脐静脉平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

公司实验室分离的小鼠脐静脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基 FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传1-2

消化液 0.25%

培养条件 气相:空气,95%CO25%

实验要点及说明:

1

.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2

.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3

.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4

.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5

.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。




细胞培养的优点:

1.

研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.

研究条件可以人为控制

pH

、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.

研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.

研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.

研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。

6.

研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
绿穗霉   热带假丝酵母  用烷L-烃生产饲料酵母。




阿舒多囊霉   豇豆慢生根瘤菌

忍冬木层孔菌   粪肠球菌

黄柄曲霉   短裙竹荪东北变种

多黏类芽孢杆菌   新月弯孢霉
大鼠无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)elisa检测试剂盒

大鼠无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)elisa检测试剂盒

大鼠吻素受体(KISS1R)elisa检测试剂盒

大鼠吻素1(KISS1)elisa检测试剂盒

大鼠胃泌素抑制肽(GIP)elisa检测试剂盒
小鼠脐静脉平滑肌细胞人超敏热休克蛋白60(HSP-60)elisa检测试剂盒

人超敏热休克蛋白70(HSP-70)elisa分析检测试剂盒

人超敏热休克蛋白70(HSP-70)elisa检测试剂盒

人超氧化物歧化酶(SODelisa检测试剂盒

人巢蛋白1(NID1)elisa分析检测试剂盒

实验报告:

分离与培养:

1

、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;

2

、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3

、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;

4

、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;

5

、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;


二、免疫荧光鉴定:

1

、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min

2

PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1Triton X-100透膜15min

3

PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min

4

、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5

PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h

6

、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。





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