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UltraTaq DNA聚合酶

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更新时间:2022-09-23

有效日期:还剩360

产品详情

商品属性:

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产品货号

UltraTaq DNA聚合酶

UltraTaq DNA   Polymerase

250U

BJ-F0164143

商品介绍:

采用分子进化技术在普通Taq酶基础上进行改造、制备的新型聚合酶UltraTaq酶具有快速、高灵敏度、抗力等特点,是新一代的PCR聚合酶。使用UltraTaq能获得更理想的扩增结果,并大幅度缩短扩增反应时间。

产品组成:

组份 JN0025-250U

UltraTaq DNA 聚合酶(5U/μl 50μl

dNTP混合液(各10mM 200μl

5×UltraTaq   Buffer with Mg2+ 2ml

产品特点:

1、快速:UltraTaq扩增速度为普通Taq酶的4倍,72℃保温10-15秒可延伸1kb以上。

2、高效:以λDNA为模板,扩增长度可达8kb,能高效扩增≤6kb片段;对于人基因组DNA等复杂模板,能有效扩增出3kb特定基因片段(图例一)。

3、高灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段(图例二)。在同样条件下对于基因组DNA的扩增显著优于Taq酶。

4、*配方的5×Buffer:使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。

产品用途:

1、常规PCR鉴定;

2、小片段目标基因克隆;

3、基因组片段扩增;

4、平端PCR产物加A

5、双脱氧法测序;

6、荧光定量PCR

使用建议:

1、使用本试剂扩增得到的PCR产物3 端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。

2、由于UltraTaq酶的准确度低于Pfu/Fast Pfu聚合酶,如需扩增克隆较长片段建议换用Pfu/Fast Pfu酶。当扩增大片段时,UltraTaq酶的扩增效率低于UltraTaq Plus酶,在扩增大片段时建 议换用UltraTaq Plus酶。

实验步骤:

(1)

实验开始前将RNA提取液于65水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL80ul,50mL中加入300ul)

(2)

取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀

(3)65

水浴3-10 min,期间混匀2-3

(4)

加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)

(5)

取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)

(6)

加入1/4V体积10M LiCl溶液,4放置6h以上(或过夜)

(7)10,000rpm,4

离心20min

(8)

弃上清,500ul SSTE溶解沉淀

(9)

::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)

(10)

2V体积的无水乙醇,-70冰箱沉淀30min以上

(11)12,000rpm,4

离心20 min

(12)

弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥

(13)

200ulDEPC处理水溶解

(14)

用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量

(

在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)






操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。本产品仅用于科研

1

.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm

2

.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为375%CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)2分钟×3次。

3

.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20冰冻可保存2周以上。

4

30%H2O2 1+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。

5

.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型,混匀)37或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS3×5分钟。蒸馏水洗1次。

6.

后固定:消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。

7

.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-422—4小时。吸取多余液体,不洗。

8

.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42杂交过夜(根据杂交情况可以调节)

9

.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;370.5×SSC洗涤15分钟×1; 370.2×SSC洗涤15分钟×1(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2)

10.

滴加封闭液:3730分钟。甩去多余液体,不洗

11.

滴加化鼠抗*37 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。

12.

滴加SABC3720分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。

13.

滴加化过氧化物酶:3720分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS5分钟×4次。

14.DAB

显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。

15.

必要时苏木素复染,充分水洗。

16.

酒精脱水,二甲苯透明,封片。
动物单核白细胞/淋巴细胞分离试剂盒






动物多核白细胞分离试剂盒

白细胞完全培养液

白细胞增长培养液

DMEM完全培养液
鱼释放激素(GH)elisa              α-Lapachone  4707-33-9  中文名:  分子式:C15H14O3  

鱼促上腺皮质激素elisa   鱼促上腺皮质激素试剂盒   规格型号:96T/48T   鱼促上腺皮质激素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa(进口分装),产品别名:鱼促上腺皮质激素试剂盒、鱼促上腺皮质激素eisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。      中文名:  分子式:C17H17ClN6O3  度:98.0%  关键词:  

鱼促卵泡素     α-Lipoic acid  中文名:  分子式:C8H14O2S2  度:98.5%

鱼促黄体激素elisa   鱼促黄体激素试剂盒   规格型号:96T/48T   鱼促黄体激素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa(进口分装),产品别名:鱼促黄体激素试剂盒、鱼促黄体激素试eisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  α-Spinasterol  中文名:α-菠甾醇  分子式:C29H48O  度:97.0%

鱼促黄体激素     α-Lipoic acid    分子式:C8H14O2S2
UltraTaq DNA
聚合酶罗汉果苷III HPLC98% 20mg 小鼠整合素αM(Itgam/CD11b)elisa ,英文名: Itgam/CD11b ELISA Kit

罗汉果苷IV HPLC98% 20mg 小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA检测试剂盒MousePerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 96T/48T

罗汉果苷VI HPLC98% 20mg 人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)试剂盒 Human MIP-1α ELISA kit

罗汉果黄素 HPLC98% 10mg RatAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa规格:96T/48T

罗汉果皂苷ⅡA HPLC98% 10mg 载玻片细胞βRUNX3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20

罗汉果皂苷ⅢA HPLC98% 10mg Mouse8-isoprostaglandin,8-iso-PGelisa小鼠8异前列(8-iso-PG)elisa规格:96T/48T

罗汉果皂苷IIIe HPLC98% 10mg 小鼠整合素α-IIb(Itga2b/CD41)elisa ,英文名: Itga2b/CD41 ELISA Kit

罗汉果皂苷IVa HPLC98% 10mg 小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA检测试剂盒Mouseglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T

罗汉果皂苷Ive HPLC98% 20mg 人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)试剂盒 Human MDC ELISA kit

罗汉果皂苷V HPLC98% 20mg Ratalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)elisa规格:96T/48T




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商家概况

主营产品:
进口elisa试剂盒,细胞株,细胞系,菌种
公司性质:
经销商

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