产品详情
操作要点:
1
)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2
)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3
)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4
)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5 6
商品属性:
产品名称:大鼠冠状动脉成纤维细胞
货号:BJ-X97748
规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
分类:原代细胞
商品介绍:
名称 大鼠冠状动脉成纤维细胞 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠冠状动脉成纤维细胞分离自冠状动脉组织;冠状动脉是供给心脏血液的动脉,起于主动脉根部,分左右两支,行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则,将冠状动脉的分布分为三型:右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的第一对分支。左冠状动脉为一短干,发自左主动脉窦,经肺动脉起始部和左心耳之间,沿冠状沟向左前方行后,立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行,旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。它是构成冠状动脉壁的主要细胞成分,细胞膜上分布着多种离子通道,如电压依赖性Na+通道、多种Ca2+通道和K+通道;它们参与了静息电位的维持与细胞膜电位的复极化、超极化,调节血管平滑肌的收缩及舒张功能,此外动脉粥样硬化的发展也涉及冠状动脉平滑肌细胞增殖、炎症及凋亡等。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。 5.方法简介: 公司实验室分离的大鼠冠状动脉成纤维细胞采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 公司实验室分离的大鼠冠状动脉成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传2-3代左右;2代以内状态佳 消化液 0.25% 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1
)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2
)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3
)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:产品仅用于科研
1
)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
侵蚀侏儒囊菌 0.1%蛋白胨水溶液200ml
硫乙醇酸盐流体培养基40ml 头孢霉
亮白曲霉 白色噬琼胶菌
肠炎沙门氏菌肠炎亚种 委内瑞拉链霉菌
粪肠球菌冻干粉 枯草芽孢杆菌
大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa检测试剂盒
大鼠整合素样金属17(ADAM17)elisa检测试剂盒
大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)elisa检测试剂盒
大鼠整合素α2+β1(ITGA2+ITGB1)elisa检测试剂盒
大鼠整合素α2(ITGA2)elisa检测试剂盒
大鼠冠状动脉成纤维细胞人骨钙素/骨蛋白(OT/BGP)elisa分析检测试剂盒
人骨碱性磷酸酶(BALP)elisa分析检测试剂盒
人骨碱性磷酸酶(BALP)elisa检测试剂盒
人骨胶原交联(Cr)elisa分析检测试剂盒
人骨膜蛋白/成骨细胞特异性因子2(POSTN)elisa分析检测试剂盒
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