3512-Asante NaTRIUM Green 2 AM 钠离子荧光探针

ANG-2 ( Asante NaTRIUM Green^TM 2) 钠离子荧光探针

搜索关键词：

Teflab Inc；SBFI；Asante NaTRIUM GreenTM2；Sodium GreenTM；CoroNaTM；

基本描述：

ANG-2 ( Asante NaTRIUM GreenTM2)是Teflab Inc.开发的一代Na+指示剂，具有一系列理想特征，包括高灵敏度、高加载率和优秀的荧光亮度和动力学范围。ANG-2用可见光激发，从而允许用适用于钙离子高通量筛选和细胞/离子通道研究的仪器来检测。【见表I Teflab钠离子荧光指示剂产品特征】

产品优势：

1. 与传统紫外光激发的钠离子指示探针相比：SBFI是由紫外光激发（UV light）的钠离子荧光探针，对仪器要求高；且加载比较难。目前大部分实验室备有的都是可见光激发比如FITC或TRITC的荧光检测系统。

2. 与其他公司可见光激发的钠离子指示探针相比：Molecular Probe（life）开发的Sodium GreenTM，CoroNaTMRed和CoroNaTMGreen，这些探针表现出以下缺点：细胞检测效率不高、无法检测到微小的Na+浓度变化，探针的细胞泄露。

应用案例【ANG-2 ( Asante NaTRIUM Green2)】：

Fig 1. Response of intracellular ANG-2 to Na+ influx. 往REF52成纤维细胞加载ANG-2 AM并用145mMN-甲基-D-葡糖胺（N-methyl-D-glucamine (NMG) gluconate）维持培养。为了除去细胞内的Na+和K+，细胞用50µM两性霉素B（一种多烯微生物代谢产物，能显著提高单价阳离子如Na+，K+，H+和Cl-的膜渗透性）。细胞外培养基内添加各种浓度的NaCl（5，15,45,145mM）以提高【Na+】浓度。每一次NaCl加入，当胞内和胞外钠离子达到平衡后，能检测到相对应增加的胞内荧光信号。实验zui后部分，等量的KCl加入以提高【K+】到145mM（典型的细胞溶质值）。K+的加入实际上降低ANG-2荧光信号。图中的荧光变化值是对25个细胞搜集到的平均值。【J. Kao, Univ. of Maryland Medical School】

实验方法【图1，仅作参考】

REF52成纤维细胞用含2µM ANG-2 AM，10% FBS的碳酸盐缓冲-DMEM（HCO3-DMEM）培养基重悬，并置于5% CO2/95% O2的环境内室温孵育60min。培养基还加有0.0075%（w/v）的Pluoronic F-127以促进探针分散进入培养基内。细胞然后转移到145 mM NMG gluconate（pH 7.4）。两性霉素B配成50mM DMSO储存液，用水溶性培养基经1000倍稀释到需要的工作浓度。适当体积的4M NaCl或KCl加入水溶性溶液达到需要浓度。ANG-2用488nm荧光激发，用冷CCD收集荧光图片。【J. Kao, Univ. of Maryland Medical School】

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参考资料：

Christophe M. Lamy, Jean-Yves Chatton, Optical probing of sodium dynamics in neurons and astrocytes, NeuroImage, Volume 58, Issue 2, 15 September 2011, Pages 572-578, ISSN 1053-8119, 10.1016/j.neuroimage.2011.06.074.【此文献重点突出ANG-2的使用以及其改善的性能】。

MERCK poster presented at SLAS 2012: Evaluation of the Sodium Sensing Dye Asante Natrium Green 2 in a Voltage-gated Sodium Channel Assay in 1536-well Format. Department of Exploratory Sciences and Screening Merck Research Laboratories

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Asante NaTRIUM Green 2 AM 钠离子荧光探针

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