产品详情
细胞名称 人癌细胞;MDA-MB-231
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 MDA-MB-231是从一名51岁的白人女性癌患者的胸水中分离建立的。该细胞表达表皮生长因子EGF受体、TGF-α受体和WNT7B癌基因。
培养条件 L15: Leibovitz Medium 10%FBS
传代方法 1:2~1:4传代;每周2~3次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12,13;D13S317:13;D16S539:12;D18S51:11,16;D19S433:11,14;D21S11:30,33.2;D2S1338:20,21;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:8,9;D8S1179:13;FGA:22,23;TH01:7,9.3;TPOX:8,9;vWA:15,18;
同工酶
染色体 58~61,有巨核
使用权限 A类人癌细胞;MDA-MB-231实验方法和步骤
(一) 前处理 用台称称量青蛙或蟾蜍的体重,然后按10微克/克动物体重的剂量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小时后,将动物处死,用剪刀剪开皮肤和肌肉,取出大腿骨和胫骨,剔净股骨上的肌肉,然后用一小块纱布来回搓干净。剪开两端股骨,用注射器(内装5ml 1% 柠檬酸钠溶液)缓慢冲洗骨髓细胞到离心管中,经平衡后离心8分钟,速度为1000转/分钟。
(三) 低渗 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管冲匀沉淀物,在恒温水浴(28℃)处理20分钟或更长一点时间。
(四) 固定 低渗后,以每分钟1000转速度离心10分钟。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,冲散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 冲匀后静止固定20分钟。重复固定1~2次,离心的速度与时间以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,冲匀沉淀物。从冰箱取出预先冷冻的载片,每片滴3滴细胞悬液,立即用嘴向载片上吹气,使细胞均匀分散,在酒精灯火焰上来回烤一下,以助染色体更好分散和展开。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分钟(Giemsa原液用PH=6.8磷酸缓冲液稀释),然后用水冲洗,片干后镜检。 (七) 镜检 在中倍镜下找染色体分散好的中期分裂相,转至高倍镜详细观察两栖类染色体的数目,属于大、中、小染色体各有多少条。
注意事项:
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
应用:利用分子筛作用,进行缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子;工业脱盐。
性状:白色微球,多孔
凝胶类型:凝胶过滤填料,亲水型凝胶
结构成分:交联右旋糖酐
粒径:细颗粒20-80μm,中颗粒50-150μm,粗颗粒100-300μm
工作PH值:2-13
操作温度:4-40℃
球蛋白分离范围:1000-5000
保存条件:4-25℃
中文名称:葡聚糖凝胶G-200;交联葡聚糖G-200
英文名字:Sephadex G-200
应用:利用分子筛作用,进行多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定
性状:白色微球,多孔
凝胶类型:凝胶过滤填料,亲水型凝胶
结构成分:交联右旋糖酐
粒径:40-120μm
工作PH值:2-10
操作温度:4-40℃
球蛋白分离范围:3000-600000
保存条件:4-25℃
中文名称:葡聚糖凝胶G-150;交联葡聚糖G-150
英文名字:Sephadex G-150
应用:利用分子筛作用,进行多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定
性状:白色微球,多孔
凝胶类型:凝胶过滤填料,亲水型凝胶
结构成分:交联右旋糖酐
粒径:40-120μm
工作PH值:2-10
操作温度:4-40℃
球蛋白分离范围:5000-300000
保存条件:4-25℃
中文名称:葡聚糖凝胶G-100;交联葡聚糖G-100
英文名字:Sephadex G-100
应用:利用分子筛作用,进行多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定
性状:白色微球,多孔
凝胶类型:凝胶过滤填料,亲水型凝胶
结构成分:交联右旋糖酐
粒径: 40-120μm
工作PH值:2-10
操作温度:4-40℃
球蛋白分离范围:4000-150000
保存条件:4-25℃
类别: 蛋白质Marker
中文名称:GE低分子量蛋白标准(GE17-0446-01)
英文名字:GE LMW-SDS Marker Kit
描述及应用:
通过和标准样品对比,用PAGE检测未知样品蛋白含量。
特点:
根据迁移距离,可得清晰的条带。
通过考马斯亮蓝法或银染法,可得到肉眼可见的蛋白染色条带。
产品组成:
兔磷酸化酶b(1),67 μg,分子量(Mr) 97 000
牛血清白蛋白(2),83 μg,分子量(Mr) 66 000
鸡卵清蛋白(3),147 μg,分子量(Mr) 45 000
牛血碳酸酐酶(4),83 μg,分子量(Mr) 30 000
大豆抑制剂(5),80 μg,分子量(Mr) 20 100
牛奶α-乳白蛋白(6),116 μg, 分子量(Mr) 14 400
分子量检测范围:
14-97kDa。
储存条件:
4℃,密封储存。
中文名称:GE中分子量蛋白标准(GE17-0615-01)
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