产品详情
过氧化物酶是一个小分子(MW〜40 KD),通常可以以4:1的比率与抗体偶联。由于其体积小,它很少会引起抗体/抗原复合物形成的位阻问题。与其他标记酶相比,过氧化物酶便宜。与过氧化物酶有关的主要缺点是它们对许多防腐剂的耐受性低,即使在低浓度下也能使过氧化物酶的活性失活。HRP偶联物被广泛用作ELISA,免疫组织化学技术以及Northern,Southern和Western印迹分析的辅助检测试剂。我们提供一种快速,快速(10分钟)的HRP分析,它是一步一步,均匀,无需洗涤的分析系统。该试剂盒可用于ELISA,表征酶反应动力学以及高通量筛选氧化酶抑制剂等。
吸光度酶标仪 | |
吸光度 | 576±5纳米 |
推荐板 | 清除底部 |
荧光酶标仪 | |
激发 | 540纳米 |
发射 | 590纳米 |
隔断 | 575纳米 |
推荐板 | 纯黑色 |
组分A:Amplite™红色过氧化物酶底物 | 1个小瓶 |
成分B:H2O2 | 1小瓶(3%稳定溶液,200 µL) |
组分C:测定缓冲液 | 1瓶(100毫升) |
组分D:辣根过氧化物酶 | 1瓶(20单位) |
成分E:DMSO | 1小瓶(1毫升) |
重要笔记
开始实验之前,请在室温下解冻所有试剂盒组件。在硫醇如DTT和β-巯基乙醇的存在下,组分A是不稳定的。浓度高于10 µM的硫醇的存在会大大降低测定的动态范围。NADH和谷胱甘肽(还原形式:GSH)可能会干扰测定。
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1. Amplite™红色过氧化物酶底物储备液(100X):
将250 µL DMSO(组分E)添加到Amplite™红色过氧化物酶底物(组分A)的小瓶中,制成100X Amplite™红色过氧化物酶底物原液。储备溶液应及时使用。远离光线。
2. HRP标准溶液(20 U / mL):
将1 mL测定缓冲液(组分C)添加到辣根过氧化物酶(组分D)小瓶中,制成20 U / mL HRP标准溶液。
3. H 2 O 2储备溶液(20 mM):
将22.7 µL的3%H 2 O 2(0.88 M,组分B)添加到977 µL的测定缓冲液(组分C)中,制成20 mM H 2 O 2储备溶液。注意:稀释的H 2 O 2溶液不稳定。未使用的部分应丢弃。
为了方便起见,请使用我们的系列稀释计
在1999 µL分析缓冲液(组分C)中加入1 µL 20 U / mL HRP标准溶液,得到10 mU / mL HRP标准溶液(SD7)。取10 mU / mL HRP标准溶液(SD7)并进行1:3连续稀释,以使用测定缓冲液(组分C)获得连续稀释的HRP标准溶液(SD6- SD1)。
将50μL的100X Amplite™红色过氧化物酶底物储备溶液和50μL的20 mM H 2 O 2储备溶液添加到4.9 mL的测定缓冲液(组分C)中,制成HRP工作溶液。远离光线。
11551 | Amplite™比色法过氧化酶检测试剂盒 *蓝色* | Amplite™ Colorimetric Peroxidase Assay Kit *Blue Color* | 1 kit |
11552 | Amplite™荧光法过氧化酶检测试剂盒 *红色荧光* | Amplite™ Fluorimetric Peroxidase Assay Kit *Red Fluorescence* | 1 kit |
11553 | Amplite™荧光法过氧化酶检测试剂盒 *近红外荧光* | Amplite™ Fluorimetric Peroxidase Assay Kit *Near Infrared Fluorescence* | 1 kit |
11559 | Amplite™发光法过氧化酶检测试剂盒 | Amplite™ Luminometric Peroxidase Assay Kit | 1 kit |
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