45900-ReadiUse™Stayright™ 20X HRP Chromogen

3,3'-二氨基联苯胺（DAB）已被用作zui常用的IHC色原，因为它便宜且对常规应用敏感。但是，已证明DAB具有诱变性，并且对实验室工作人员和环境有害。为了解决这个问题，AAT Bioquest开发了这种新颖的Stayright™Purple，它比DAB更安全地用作IHC色原。此外，Stayright™Purple提供了一种快速简便的方法，可在HRP存在的情况下以DAB的高灵敏度产生干净而强烈的紫色污渍。即用型Stayright™Purple HRP底物还显示出非诱变作用，细胞毒性zui小。ReadiUse™Stayright™紫色过氧化物酶（HRP）底物适用于基于过氧化物酶（HRP）的免疫组织化学（IHC）和原位杂交（ISH）染色方法。基材是含有过氧化氢的稳定的预混合溶液，因此无需任何混合步骤，即可使用。在HRP诱导的氧化作用下，Stayright™Purple在测定的目标部位形成紫色不溶性沉淀产物。紫色zui终产品不溶于有机溶剂和有机固定介质，因此可以通过常规的脱水和盖玻片步骤保持明显的紫色污点。

1. 在组织切片上涂抹即用型Stayright™Purple解决方案。
2. 孵育组织切片5-15分钟。
3. 漂洗组织5-10分钟，复染。
4. 添加安装介质以覆盖该部分。

程序

1. 用即用型Stayright™Purple解决方案覆盖部分。在室温下孵育5-15分钟。
2. 将载玻片浸入dH ₂ O中以停止颜色发展并监控染色强度。如果染色强度不够明亮，则需要更长的孵育时间。您可以重新应用Stayright™Purple解决方案来继续开发。
3. 用dH ₂ O 洗涤5-10分钟。
4. 如果需要，请使用所需的复染色。
5. 用乙醇脱水，然后固定在有机固定介质中。

图片

图1. FFPE肺腺癌组织中EpCAM的免疫组织化学检测。将组织切片与聚-HRP共轭的山羊抗兔IgG孵育，然后分别用Stayright™Purple（左）或DAB（右）显影。细胞也用苏木精复染。Stayright™Purple产生的深层污渍具有高灵敏度和清晰的分辨率，类似于DAB。

图2.固定了人肺腺癌组织样品并对其进行了EpCAM染色。将组织切片与抗EpCAM兔单克隆抗体（左）或同种型IgG作为阴性对照（右）一起孵育。然后将样品与结合了HRP的山羊抗兔IgG抗体孵育，并用Stayright™Purple溶液显影信号。Stayright™Purple可以产生干净的紫色污渍，没有背景。

图3. Stayright™Purple和DAB对HeLa细胞增殖的细胞毒作用比较。AAT的WST-8测定法（Cat＃22770）用于确定约0、2、6、18、55、100、150、200、400、500、800或1000μg/ mL Stayright™处理 45900 ReadiUse™Stayright™紫色* 20X HRP Chromogen预混有过氧化氢* ReadiUse™ Stayright™ Purple *20X HRP Chromogen Premixed with Hydrogen Peroxide* 5 ml 45901 ReadiUse™Stayright™紫色* 20X HRP Chromogen预混有过氧化氢* ReadiUse™ Stayright™ Purple *20X HRP Chromogen Premixed with Hydrogen Peroxide* 50 ml 45905 Stayright™紫色 Stayright™ Purple 5 ml 45906 Stayright™紫色 Stayright™ Purple 50 ml