CCD-1095Sk（人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞）

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

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操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
准备DMEM-H培养基(GIBCO,货号1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。也可根据实验需要选择悬浮培养基，使293T细胞悬浮生长。
培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
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细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
改良番茄汁培养基 Tomato Juice Agar,Modified 250g

MC培养基 Chalmers Agar,Modified 250g

BLB琼脂 BLB agar 250g

MRS琼脂 MRS Agar 250g

LBS琼脂 LBS　agar 250g

M17琼脂 M17 Agar 250g

M17肉汤 M17 Broth 250g

乳酸杆菌选择性琼脂 Lactobacillus Selective Agar 250g

APT琼脂 APT Agar 250g

BL琼脂培养基 BL Agar Medium 250g

BBL琼脂培养基 BBL Agar Medium 250g

TPY琼脂培养基 TPY Agar Medium 250g

PYG液体培养基基础 PYG Broth Medium Base 250g

三聚氰胺标准品 Melamine 100mg

CCD-1095Sk(人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞)N端外显肽(Ext-N)elisa检测试剂盒 英文名称 ：Ext-N ELISA Kit，英文缩写：Ext-N，

DNA甲基转移酶1(DNMT1)elisa检测试剂盒 英文名称 ：DNMT1 ELISA Kit，英文缩写：DNMT1，

CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)elisa检测试剂盒 英文名称 ：C/EBPδ ELISA Kit，英文缩写：C/EBPδ，

Ⅱ型前胶原N端前肽(PⅡNP)elisa检测试剂盒 英文名称 ：PⅡNP ELISA Kit，英文缩写：PⅡNP，

2，3-二磷酸甘油酸(2，3-DPG)elisa检测试剂盒 英文名称 ：2，3-DPG ELISA Kit，英文缩写：2，3-DPG，

酸性成纤维细胞生长因子(AFGF/FGF1)elisa检测试剂盒 英文名称 ：AFGF/FGF1 ELISA Kit，英文缩写：AFGF/FGF1，

白细胞介素3(IL-3)elisa检测试剂盒 英文名称 ：IL-3 ELISA Kit，英文缩写：IL-3，

组织蛋白酶D(CTSD)elisa检测试剂盒 英文名称 ：CTSD ELISA Kit，英文缩写：CTSD，

转胶蛋白3(TAGLN3)elisa检测试剂盒 英文名称 ：TAGLN3 ELISA Kit，英文缩写：TAGLN3，

肿瘤坏死因子配体超家族成员12(TNFSF12)elisa检测试剂盒 英文名称 ：TNFSF12 ELISA Kit，英文缩写：TNFSF12，

脂蛋白脂酶(LIPD)elisa检测试剂盒 英文名称 ：LIPD ELISA Kit，英文缩写：LIPD，

粘蛋白21(MUC21)elisa检测试剂盒 英文名称 ：MUC21 ELISA Kit，英文缩写：MUC21，

原肌球调节蛋白4(TMOD4)elisa检测试剂盒 英文名称 ：TMOD4 ELISA Kit，英文缩写：TMOD4，

鱼精蛋白3(PRM3)elisa检测试剂盒 英文名称 ：PRM3 ELISA Kit，英文缩写：PRM3，