ATP-超微量总ATP酶实验代测

超微量总ATP酶实验代测

测定原理：ATP酶可分解ATP生成ADP及无机磷，测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低。
ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，它在物质运送、能量转换以及信息传递方面具有重要的作用，机体在缺氧及一些疾病状态下，此酶活力发生一系列改变，另外有些遗传疾病也与此酶活力有关。ATP酶活力的大小是各种细胞能量代谢及功能有无损伤的重要指标。

ATP酶又称为三磷酸腺苷酶，是一类能将三磷酸腺苷（ATP）催化水解为二磷酸腺苷（ADP）和磷酸根离子的酶，这是一个释放能量的反应。在大多数情况下，能量可以通过传递而被用于驱动另一个需要能量的化学反应。这一过程被所有已知的生命形式广泛利用。

 产品优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取样本量100ul。
3、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
4、再现性好：变异系数CV=1.7%。
5、回收试验： X =103.3%。
6、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
7、测试面广：可测动物组织、红细胞以及各种培养细胞、各种水产等，效果均佳。
所需仪器及自备试剂：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为636nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器

样本收集与前处理：
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

操作流程：
1、酶促反应：按说明操作加入样本100l和混合试剂，37℃准确反应10分钟
2、加R4，3500转/分，离心10分钟，取上清
3、定磷：取上清液加入显色剂，室温静置2分钟加R6
4、室温静置5分钟636nm波长，1cm光径，比色

超微量总ATP酶实验代测