产品详情
中文名称:细胞活力检测试剂盒(化学发光法)
英文名称:Luminescent Cell Viability Assay Kit
产品规格:100次|500次
产品货号:LZ-01X6365
发货周期:1~3天
商品介绍:
本试剂盒是一种通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而来定量检测活细胞数目的试剂盒。本试剂盒的性能和用途与Promega公司的同类产品基本相同,对于相同的细胞样品本试剂盒的发光效果更强一些。 本试剂盒比常见的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它细胞活力测定方法更加简单快捷。只需把试剂盒提供的检测试剂与培养细胞等体积混合,反应10分钟后即可进行化学发光检测。无需洗涤细胞,也无需更换或去除培养液。并且化学发光非常稳定,在反应开始后的10分钟内无显著变化,30分钟内的下降不超过10%。 本试剂盒不仅适合少量样品的检测,也非常适合大量样品的高通量筛选检测。 本试剂盒线性范围广,检测灵敏度高。用96孔板进行检测时,本试剂盒在0-50,000个细胞/孔的细胞密度范围内有良好的检测效果,并且在仅有几百个细胞时仍有良好的线性关系。当细胞数量仅为50个/孔时,发光强度可达空白孔的5倍左右。 ATP,作为重要的能量分子,在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP是细胞新陈代谢的一个重要指标,也是具有代谢活性细胞的重要标志性分子,并和活细胞数目成良好的线性关系。因此,ATP含量能很好地反应活细胞的数目,即本试剂盒可以通过测定ATP含量来进行细胞计数或检测细胞活力。 本试剂盒通过ATP检测细胞活力的原理参考下图。借助ATP依赖的萤光素酶催化的萤光素发光反应,ATP可以通过测定化学发光来进行定量。由于ATP含量能很好地反映活细胞的数目,而ATP含量和发光强度成正比,这样就可以简单地通过化学发光强度来计算出细胞活力或细胞数目。 细胞活力检测试剂盒(化学发光法)检测ATP的原理图 对于96孔板,我们推荐使用100μl细胞培养液和100μl的检测试剂,总体积为200μl,此时本试剂盒可以进行100次检测。对于384孔板,我们推荐使用25μl细胞培养液和25μl的检测试剂,总体积为50μl,此时本试剂盒可以进行400次检测。也可以用其它体积的试剂进行检测,但细胞培养液和检测试剂体积的比例必须为1:1。 储存条件:室温,有效期2年。 |
公司产品现货供应,质量有保证、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)英文名称:sRANKL ELISA Kit腺苷活化蛋白激γ3抗体包装1g
可溶性Toll样受体9(sTLR9/sCD289)英文名称:sTLR9/sCD289 ELISA Kit腺苷单磷活化蛋白激β2抗体包装25g
可溶性Toll样受体4(sTLR4)英文名称:sTLR4 ELISA Kit磷化周期末期促进复合蛋白APC1抗体包装5g
可溶性Toll样受体2(sTLR2)英文名称:sTLR2 ELISA Kit周期末期促进复合蛋白APC1抗体包装5g
可溶性P选择(sP-selectin)英文名称:sP-selectin ELISA Kit磷化蛋白激B2抗体包装25g
可溶性Endoglin(ENG/sCD105)英文名称:ENG/sCD105 ELISA Kit磷化铁蛋白Fe65抗体包装5g
可溶性CD86(B7-2/sCD86)英文名称:B7-2/sCD86 ELISA Kit磷化铁蛋白Fe65抗体包装25g
可溶性CD40配体(sCD40L)英文名称:sCD40L ELISA Kit磷化APP淀粉样肽前体蛋白抗体包装5g
可溶性CD30配体(sCD30L)英文名称:sCD30L ELISA Kit磷化APP淀粉样肽前体蛋白抗体包装100ml
可溶性CD30(sCD30)英文名称:sCD30 ELISA Kit磷化活化复制因子2抗体包装500ml
颗粒B(Gzms-B)英文名称:Gzms-B ELISA Kit磷化活化复制因子2抗体包装5MG
颗粒A(Gzms-A)英文名称:Gzms-A ELISA Kit磷化周期末期促进复合蛋白APC1抗体包装1g
抗子宫内膜抗体(EMAb)英文名称:EMAb ELISA Kit发育分化增强因子1抗体包装100g
抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)英文名称:pANCA ELISA Kit磷化发育分化增强因子1抗体包装25g
抗中性粒/中心体抗体(ACA)英文名称:ACA ELISA Kit蛋白激B3包装25ml
磷化通道蛋白2抗体C反应蛋白(CRP)Ruxolitinib phosphate (INCB018424 phosphate) 是一种有效的 JAK1/2 抑制剂, IC50 分别为3.3 nM/2
细胞活力检测试剂盒(化学发光法)季也蒙迈耶氏酵母 3,5-二叔丁基苯酸酯Elisa
平田头菇 4-BOC-哌-1-硫酰胆酸Elisa
酿酒酵母 (4-溴苯基)脲胆汁酸Elisa
短密木霉 4-氨基氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯弹性蛋白Elisa
粘质沙雷氏 N-Cbz-L-苯弹性蛋白Elisa
枯草芽孢杆 4--2,6-二氟蛋白(肽酰脯氨酰顺;反异构)Elisa
白僵 2-溴-3-羟基苯甲蛋白CElisa
黑曲霉 四邻苯二蛋白SElisa
粪肠球(粪链球) 1H-1,2,4-三氮唑-1-甲脒单盐酸盐蛋白ZElisa
藤黄微球 3-甲氧基-2-甲苯蛋白Z依赖的蛋白抑制剂Elisa
枯草芽孢杆 硫酸钛蛋白多糖Elisa
浅黄链霉 3-异喹啉蛋白激AElisa
牛链球 兰氏D群 2,3-二氟-4-溴蛋白激CElisa
大肠埃希 6-溴-3H-异苯并-1-酮蛋白激C-β1Elisa
酿酒酵母 2-甲基-3-噻吩甲酸乙酯蛋白酪激Elisa
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