细胞核提取试剂盒

商品介绍：

中文名称：细胞核提取试剂盒

英文名称：Nuclear Extraction Kit
产品规格：50T|100T

产品货号：LZ-01X6562

发货周期：1～3天

公司产品现货供应，质量有保证、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项：

1、本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

3、禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。

6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。

7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融，否则将会增加空白吸收，从而影响检测结果。最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。

8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性，则测定不含细胞，仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入 MTS ，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。

9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，对于大多数情况孵育 1 小时即可，白细胞需要培养较长时间。

11、如果不是使用 96 孔板检测，MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
Corin蛋白(CRN)英文名称：CRN ELISA KitCD80抗体包装250mg

Cerberus蛋白(CER)英文名称：CER ELISA KitCD19抗体包装1g

CD83分子(CD83)英文名称：CD83 ELISA KitC-C元件趋化因子26抗体包装250mg

CD5抗原样蛋白(CD5L)英文名称：CD5L ELISA Kit5号染色体开放阅读框22抗体包装25g

CD40配体(CD40L)英文名称：CD40L ELISA Kit钙激活离子通道4蛋白抗体包装5g

CD3d分子(CD3d)英文名称：CD3d ELISA Kit嗜粒趋化蛋白3抗体包装1g

CD320分子(CD320)英文名称：CD320 ELISA Kit嗜粒趋化蛋白3抗体包装250mg

CD30配体(CD30L)英文名称：CD30L ELISA Kit趋化抗体包装25g

CD163分子(CD163)英文名称：CD163 ELISA Kit5号染色体开放阅读框55抗体包装5g

CD14分子(CD14)英文名称：CD14 ELISA Kit表面趋化因子受体7抗体包装1g

CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)英文名称：CEBPβ ELISA Kit色c氧化7A2抗体包装5g

C4结合蛋白α(C4BPα)英文名称：C4BPα ELISA KitCD36抗体包装100g

B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)英文名称：Bcl2 ELISA Kit固合成CYP11B2抗体包装25g

B-细胞激活因子受体(BAFFR)英文名称：BAFFR ELISA Kit7号染色体开放阅读框16抗体包装5g

B-细胞激活因子(BAFF)英文名称：BAFF ELISA Kit10号染色体开放阅读框62抗体包装1g

: IFFI2377资源名称: 黑曲霉 质量规格：HPLC>98%,标准品乙酰肝试剂盒银锻苷;Tiliroside

淡紫拟青霉Paecilomyces│lilacinus (Thom) Samson 质量规格：纯度>99%,AR乙酰羧化合成试剂盒印;Indaconitone

IMRUR1547资源名称: 披发糖多孢菌 质量规格：HPLC>98%,标准品乙酰酯试剂盒盐黄柏碱;Phellodendrine
细胞核提取试剂盒香菇 7-溴-2,4(1H,3H)-喹唑啉二酮并殖吸虫Elisa

人鱼发光杆人鱼亚种 (E)-3-(叔丁基二甲基硅氧基)烯-1-基-酸频哪酯鞭毛虫Elisa

仁果丛梗孢 N-CBZ-甘乙酯布鲁东氏酪激Elisa

醋化醋杆 3-Boc-6-氧杂-3-氮杂二环[3.1.0]己烷Wnt-3a蛋白Elisa

尖孢 2,3,6-三氟苯基乙酸低氧诱导因子Elisa

格尔木马赛 伊班磷酸甘肽Elisa

嗜热链球 苯并[b]噻吩并-3-基酸鼠基因相关蛋白Elisa

假单胞 3,5-二甲基-吡唑-4-羧酸转化蛋白RhoA-GTPElisa

绿粘帚霉 Boc-D-精盐酸盐谷氧化Elisa

平滑白蛋巢 (1S,4S)-2-Boc-2,5-二氮双环[2.2.1]庚烷谷氧化Elisa

冬菇属 1-苯基-1H-吡唑-4-羧酸β位淀粉样前体蛋白裂解1Elisa

节杆 2-氨基-4-苯基酮戊二酸Elisa

灰色链霉灰色亚种 B-(6,9-二苯基-9H-咔唑-3-基)酸EB病抗体Elisa

洋葱伯克霍尔德 3-(二甲氨基)-2-异基烯酸甲酯α淀粉Elisa

胶孢 2-(2--5-苯甲基)-5-(6-氟吡啶-3-基)噻吩胆囊收缩;缩胆囊八肽Elisa