蔗糖-PBS溶液(10%)

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中文名称：蔗糖-PBS溶液(10%)

英文名称：
产品规格：500ml

产品货号：LZ-01X6928

发货周期：1～3天

商品介绍：

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

ESAM Protein Human 重组人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 (Fc 标签)

Ractopamine/BSA 莱克多巴胺与牛血清白蛋白偶联物 1mgRactopamine/BSA 莱克多巴胺与牛血清白蛋白偶联物

NS1重组甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural / NS1 蛋白 (His 标签) Protein

ERBB4 Protein Human 重组人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (His 标签)

TNFRSF4重组人 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (His 标签) Protein

FGFR3重组小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

CGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 0.5mgCGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 ) 软骨糖蛋白39(多肽)

PLAU重组人 Urokinase / PLAU (activated by trypsin) 蛋白 (His 标签) Protein

CCL14 Protein Human 重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 标签)

LCN2 Protein Mouse 重组小鼠 LCN2 / NGAL 蛋白 (His 标签)

CGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 0.5mgCGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 ) 软骨糖蛋白39(多肽)

CCL14 Protein Human 重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 标签)

FGFR3重组小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

LCN2 Protein Mouse 重组小鼠 LCN2 / NGAL 蛋白 (His 标签)

PLAU重组人 Urokinase / PLAU (activated by trypsin) 蛋白 (His 标签) Protein

SEMA4D Protein Mouse 重组小鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 蛋白 (His 标签)

GAPDH 3-磷酸甘油醛脱氢酶(人 0.5mgGAPDH 3-磷酸甘油醛脱氢酶(人)抗原

CD68重组大鼠 CD68 / Macrosialin 蛋白 (Fc 标签) Protein

PDGFRB重组人 PDGFRB / CD140b 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

IL17A Protein Human 重组人 IL17 / IL17A 蛋白
蔗糖-PBS溶液(10%)大肥菇 3,5-二-4-叶脉斑驳病Elisa

慢生根瘤 2-环己基乙盐酸盐酪蛋白激Elisa

球孢白僵 5-甲基-3(2H)-哒酮羟赖吡啶啉Elisa

解淀粉盐盒 3-溴-4-赖吡啶啉Elisa

香菇 2-(对苄基)苯并咪唑玉米黄质Elisa

异常汉逊酵母异常变种 N-乙酰二酸单乙酯β-隐黄质Elisa

荣州假黄单胞 对甲酸苄酯芳香族L-酸脱羧Elisa

钉斑链霉 1-溴-4-甲氧基萘隐花色1AbElisa

赭盖红菇 4-硝基邻苯二甲酸酐水杨酸合成Elisa

球孢枝孢 4-甲氧基肉桂酸-2-乙基己酯磷酸转移乙酰Elisa

芽枝状枝孢 2,4-二氢-6,7-二氢-5H-环戊基并[d]嘧啶丁酸激Elisa

金黄色葡萄球  4,4'-双(4--1-萘基偶氮)-2,2'-芪二磺酸磷酸转移丁酰Elisa

新月弯孢 3,5-二甲基-4-异恶唑甲甲基二酰变位Elisa

酿酒酵母 3-伏马Elisa

耐赖芽孢杆 外消旋-反-2-环己盐酸盐黄曲霉B1Elisa

注意事项：

1、本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

3、禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。

6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。

7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融，否则将会增加空白吸收，从而影响检测结果。最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。

8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性，则测定不含细胞，仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入 MTS ，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。

9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，对于大多数情况孵育 1 小时即可，白细胞需要培养较长时间。

11、如果不是使用 96 孔板检测，MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。