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大鼠心脏微血管周细胞

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更新时间:2023-10-16

有效日期:还剩172

产品详情

我司全程提供细胞生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、组织、冻存条件等复苏及冻存细胞株说明书信息,我们专业您的细胞系实验,让您实验再无烦扰!产品仅用于科研

产品名称

规格

分类

货号

大鼠心脏微血管周细胞

5×10Cells/T25培养瓶

原代细胞

BJ-X97645

商品介绍:
名称   大鼠心脏微血管周细胞
2.组织来源:心脏组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

大鼠心脏微血管周细胞分离自心脏组织;心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官,主要功能是为血液流动提供压力,把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成,左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开,故互不相通,心房与心室之间有瓣膜(房室瓣),这些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动,向器官、组织提供充足的血流量,以供应氧和各种营养物质,并带走代谢的终产物(如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等),使细胞维持正常的代谢和功能。心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面单层扁平上皮样细胞,它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用,在心脏血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。近年来大量研究表明,心肌微血管周细胞的功能和病理改变直接影响心肌细胞功能,也是诸多毒素、炎症因子及病毒等重要靶位,其作为体外研究的细胞模型在心肌缺血-再灌注发病机制和细胞间旁分泌细胞生长因子研究中起着重要作用。

5.方法简介:

公司实验室分离的大鼠心脏微血管周细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

公司实验室分离的大鼠心脏微血管周细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

包被条件 PLL0.1mg/ml

培养基 FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3-5代左右;3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相:空气,95%CO25%

实验要点及说明:

1

.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2

.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3

.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4

.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5

.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。




细胞培养的优点:

1.

研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.

研究条件可以人为控制

pH

、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.

研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.

研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.

研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。

6.

研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
多黏类芽孢杆菌   刺孢吸水链霉菌昆明变种 Streptomyces hygrospinocus




无壳曲霉   苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

土曲霉   长根菇(长根奥德磨)

奇异变形杆菌冻干粉   黑菇、烟色红菇

单增李斯特菌   阿达青霉
大鼠白介素10(IL10)elisa检测试剂盒

大鼠白蛋白启动子D位点结合蛋白(DBP)elisa检测试剂盒

大鼠白蛋白(ALB)elisa检测试剂盒

大鼠八聚体结合转录因子4(OCT4)elisa检测试剂盒

大鼠氨乙酰丙酸δ脱水酶(ALAD)elisa检测试剂盒
大鼠心脏微血管周细胞大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa检测试剂盒

大鼠肿瘤坏死因子β(TNFβ)elisa检测试剂盒

大鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)elisa检测试剂盒

大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)elisa检测试剂盒

大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-)elisa检测试剂盒

实验报告:

分离与培养:

1

、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;

2

、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3

、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4

、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;

5

、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;


二、免疫荧光鉴定:

1

、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min

2

PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1Triton X-100透膜15min

3

PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min

4

、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5

PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h

6

、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。





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