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1.实验前将所有试剂平衡至室温,包括样本、TMB(非常重要)。
2.强烈建议老师在操作的时候每个样本包括标准品做复孔(请务必这样操作),因为这样可以:求平均值,确保实验结果的准确性对试剂盒的性能进行评估 对自己的操作进行评估解决跳孔
3.为保证老师 ELISA 实验结果准确 ,其中几点重要的操作注意事项请务必参考:如果以下表述与说明书中不一致,请按照实验对应说明书的要求操作 。
1)标准品溶解:标准品溶解严格按照说明书进行操作,建议老师进行标准品稀释时,在EP管中进行。
2)孵育:说明书中进行孵育的时候,一定要用微孔板振荡器振荡,这个很重要,利于抗原抗体充分结合。
3)洗板:建议按照说明书操作,每次洗涤至少洗液浸泡30s,重复6次,洗板时间太短、次数太少会导致实验效果不佳,延长洗板时间和增加洗板次数可以使背景更干净。
4)如何控制标曲显色(仅针对双抗夹心法ELISA试剂盒)5 .30分钟显色时间为经验范围,每个具体的实验,可根据以下情况,确定大致的显色时间:
①肉眼观察:标曲S5孔有淡蓝色、Blank孔无明显蓝色时,即可终止。
② 仪器判断:630 nm左右波长下,ac标曲S1孔的OD值达到0.5 - 0.7、S5孔的OD值达到0.05 - 0.08、Blank孔的OD值小于0.05时,即可终止。
③ 高敏系列试剂盒因灵敏度更高,需严格控制显色时长,可较普通试剂盒适当缩短显色时间。
免责声明:
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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