植物叶绿素(chlorophyll)含量试剂盒,微板法

植物叶绿素(chlorophyll)含量试剂盒,微板法

植物叶绿素(chlorophyll)含量试剂盒,微板法

本试剂盒仅供科研使用 1 叶绿素含量测定试剂盒说明书 (货号:WS1060W 微板法 96 样) 一、产品简介： 叶绿素含量是植物生长过程中一个重要的生理指标，由于其对周围环境很敏感，并与植 物的光合作用、营养吸收等密切相关，被广泛作为植物生长的常规测定指标。 根据叶绿素提取液对可见光谱的吸收，在 649nm 和 665nm 处测定叶绿素提取物的吸光 值，然后利用经验公式计算出样品中叶绿素 a 含量、叶绿素 b 含量、叶绿素总含量。 二、试剂盒组分与配制： 试剂名称 规格 保存要求 试剂一 粉剂×1 瓶 4℃保存 乙醇（自备） 1000mL×1 瓶 4℃保存 抽提 Buffer 配制：（体积比）乙醇：蒸馏水=95:5 三、所需的仪器和用品： 酶标仪、96 孔板、天平、10mL 玻璃试管、锡箔纸、无水乙醇。 四、叶绿素含量的测定： 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实 验样本和试剂浪费！ 1、样本制备 （1）取新鲜植物叶片或其它绿色组织，去掉中脉。 （2）称约 0.1g 剪碎，用蒸馏水洗干净，然后加入 1mL 抽提 Buffer，少量试剂一（约 50mg）， 叶绿素对光敏感，务必在黑暗或弱光条件下充分研磨（难磨叶片可以添加少量石英砂助 磨），然后转移至 10mL 玻璃试管。 （3）用抽提 Buffer 冲洗研钵，将所有冲洗液及研钵中所有的绿色物质转入 10mL 玻璃试管， 用抽提 Buffer 补充至 10mL，玻璃试管置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提 3h，观察试 管底部组织残渣*全变白则提取*全，若组织残渣未*全变白，继续浸提至其*全变白。 2、上机检测 分别取200μL浸提液和200μL抽提Buffer于96孔板，记为测定管和空白管，分别于665nm 和 649nm 处读取吸光值 A，△A 665=(A 测定-A 空白) 665，△A 649=(A 测定-A 空白) 649。 【注】：若吸光值 A 超过 1，待检测的浸提液用抽提 buffer 稀释，计算公式乘以稀释倍数。 五、结果计算： 叶绿素 a 含量（mg/g 鲜重）=Ca× D W V   1000 叶绿素 b 含量（mg/g 鲜重）=Cb× D W V   1000 叶绿素总含量（mg/g 鲜重）=CT× D W V   1000 Ca=13.95×△A665–6.88×△A649 (mg/L)； Cb=24.96×△A649–7.32×△A665(mg/L)； CT=6.63×△A665+18.08×△A649(mg/L)； V---代表提取液体积，10mL； D---代表稀释倍数，未稀释即为 1； W---代表样本质量，g