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金四环牌压力蒸汽灭菌生物指示剂(ATCC7953)
四环牌ME-压力蒸汽灭-菌生物指示剂是由嗜热脂肪杆菌(ATCC 7953)芽孢菌片、恢复培养基溶液和外管组成。菌片回收菌量为5.0×105cfu/片~5.0×106cfu/片。生物指示剂的抗力符合标准和标准的规定:在121℃饱和蒸汽条件下,存活时间≥3.9 min,杀灭时间≤19 min,D10值1.3 min~1.9 min。
【型 号】ME-型
【使用范围】适用于医-疗卫生机-构、制药-工业、医-院制剂等各行业使用的121℃下排气式压力蒸汽灭-菌器、132℃~134℃预真空或脉动真空压力蒸汽灭-菌器、小型压力蒸汽灭-菌器灭-菌效果的监测。
【使用方法】
1 使用时,将生物指示剂放入标准检测包的或待灭-菌物品包的,置于灭-菌器难消-毒的位置,按规定的灭-菌温度和时间进行灭-菌处理。检验同时设生物指示剂阳性对照,阳性对照生物指示剂菌管放室温下,不进行灭-菌处理。
2 灭-菌完毕,即刻将生物指示剂取出,室温放置10 min,盖垂直朝上,握于手中,用适宜的工具夹取生物指示剂菌管下部,夹碎管内安瓿,使恢复培养基溶液流出,轻轻振摇,生物指示剂菌片便浸入恢复培养基溶液中,同样方法夹碎阳性对照生物指示剂菌管内安瓿,置于56℃恒温培养箱内或配套的微型培养器内培养24 h~48 h观察结果。
【结果判定】
培养后生物指示剂的恢复培养基溶液由紫色澄清液体变为黄色澄清液体即表示有菌生长,判定为灭-菌不合格;恢复培养基溶液仍为紫色澄清液体为无菌生长,同时阳性对照生物指示剂菌管中的生物指示剂生长正常即恢复培养基溶液由紫色澄清液体变为黄色澄清液体,判定为灭-菌合格。
【注意事项】
1 从灭-菌器内取出或从冰箱内取出生物指示剂菌管,需先在室温下放10 min左右,然后再夹碎安瓿,以免过热或过冷使外管破损。
2 恢复培养基溶液的pH值应≥7.2但≤7.4,pH值>7.5时,嗜热脂肪杆菌芽孢生长不良。
3 培养温度须在56℃~60℃之间,否则可导致嗜热脂肪杆菌芽孢生长不良,或不能生长。
4 灭-菌处理后,生物指示剂菌管中的恢复培养基溶液颜色与压力蒸汽灭-菌前比较会变浅,呈现浅紫色,这种变化属正常现象。
5 生物指示剂菌管内安瓿夹碎后,用手轻轻振摇,使菌片浸入恢复培养基溶液中,有利于存活细-菌芽孢的生长。
6 对生物指示剂菌管在56℃培养时间过长(72 h以上),阳性对照管中恢复培养液的黄色容易消退,菌管中的恢复培养基溶液可能因挥发逐渐变干,导致无法准确判断结果;所以应注意每天观察,记录培养结果。
7 本生物指示剂应保存于4℃冰箱内。
【有 效期】12个月。
【包装规格】20支/盒。
压力蒸汽灭-菌生物指示剂使用中应注意的问题
一、术语解释
1、载体:实验微生物的支持物
2、指示菌:可代替相应致病菌抗力水平的非致病-菌,通常使用 的标准菌株或认定的标准菌株。
3.存活时间(ST):用于生物指示物抗力鉴定时,指受试的指示物样本,经杀-菌因-子作用后全部样本有菌生长的作用时间(min)。
4.杀-灭时间(KT):用于生物指示物抗力鉴定时,指受试的指示物样本,经杀-菌因-子作用后全部样本无菌生长的作用时间(min)。
5.Q值:杀-灭微生物数量达90%所需的时间(min)。
6.杀-灭率:在微生物杀灭实验中,用百分率表示微生物数量减少的值。
7.菌落形成单位(cfu):在活菌培养计数时,由单个菌体或聚集成团的多个菌体,在固体培养基上生长繁殖所形成的集落,称为菌落形成单位,以其表达活菌的数量,一般一个菌落形成单位代表一个菌。
8.活菌计数法:测定每毫升液体中含活-菌的数量,是消-毒效果检测试验中基本的微生物操作技术。
二、使用
1.消-毒实验操作树立严格的无菌观念,一是保证人员,实验室感-染,二是保证实验质量,实验污-染。
2.压力蒸汽灭-菌效果监测方法可分为物理法有留点温度计测定法、温度记录仪、定时计;化学法有指示卡监测法、化学指示菌管、化学指示胶带:生物法有生物指示剂包括嗜热脂肪杆菌(Atcc7953)芽孢生物指示剂(又称自含式生物指示剂)和生物指示剂菌片。
3.按照标准和标准规定嗜热脂肪杆菌芽孢菌片回收菌量为5.0×105cfu/片(ml)~5.0×106cfu/片(ml),在饱和蒸汽作用下,存活时间(st)≥3.9min,杀灭时间(kt)≤19min,D值1.3min-1.9min.
4.压力蒸汽灭-菌生物指示剂主要用于121℃下排气式压力蒸汽灭-菌器、132℃~134℃预真空或脉动真空压力蒸汽灭-菌器、134℃~136℃台式或卡式蒸汽灭-菌器灭-菌效果监测。
5.压力蒸汽灭-菌用的指示菌为嗜热脂肪杆菌(Atcc7953)芽孢,干热与化学消-毒剂用指示菌为枯草杆菌黑色变种(Atcc9372)芽孢。
三、常见问题
1.消-毒试验指示菌选择的条件?
答:(1)指示菌对杀-菌因-子的抗力应大于或等于所代表的同一类致病菌,易抗力,稳定,易储存。
(2)对营养条件要求不高,在普通培养基上生长。
(3)在形态上或培养特征上易辨认,易于其他菌区别。
(4)对人与动物基本无致病性。
(5)培养与制备可达标准化。
2.压力蒸汽灭-菌生物指示剂(菌管和菌片)生物指示剂经压力蒸汽灭-菌处理后,置56℃培养为阳性原因何在?
答:可能的原因为:
(1)压力蒸汽灭-菌器性能不合格。如新购的设备性能不稳定,未做B-D试验即用,旧的设备未定期检修,指示温度和压力与灭-菌器内实际温度和压力不一致。
(2)压力蒸汽灭-菌工艺不当。如装置满载或过2/3,装放方式不合理,包装容器影响蒸汽穿透或冷空气的排出,冷空气未排净等。
(3)生物指示剂的杀-菌量标,指示菌抗力太-强。
(4)恢复培养基未按产品使用手册或消-毒技术规范上规定的配-方设备,PH值<7.2或>7.5。
3.压力蒸汽灭-菌生物指示剂菌管正常培养时对照菌管培养液为什么不变为黄色?
答:可能的影响因素为:
(1)指示菌未能与恢复培养基充分接触。灭-菌处理后,用特殊工具夹碎玻管使恢复培养基与菌片接触后,应未充分振摇,使菌片上的指示菌能与恢复培养基充分接触。
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