qiagen 12145质粒提取试剂盒Plasmid Midi Kit

qiagen 12145质粒提取试剂盒Plasmid Midi Kit

转染效率与质粒纯化方法。

采用不同方法制备pRSVcat DNA，通过脂质体介导的转染将其导入的细胞系内，40小时后测定CAT表达水平，确定转染效率。每个柱形代表4个独立的转录的平均值（2个质粒制备物分别转染2次）。使用QIAGEN Plasmid Kit可获得zui高的转染效率。

qiagen 12145质粒提取试剂盒Plasmid Midi Kit

Performance

QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN阴离子交换柱技术高效纯化质粒DNA。产量可达10 mg（Giga）、2.5 mg（Mega）、500 µg（Maxi）、或100 µg（Midi）高拷贝质粒DNA（培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基。）QIAGEN Plasmid Kits纯化的质粒DNA适合多种应用，如：转染（参见"Transfection efficiency versus plasmid purification method"）、克隆和体外转录。

Principle

QIAGEN-tips内*的阴离子交换树脂专为纯化核酸设计。它*的分离特性，使纯化的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。预装的QIAGEN-tips利用重力流原理工作，缩短了纯化质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免苯酚、lvfang、溴化乙锭和CsCl等有毒物质，减小对使用者和环境的危害。

Procedure

使用QIAGEN Plasmid Kits，细菌裂解物通过离心澄清。澄清后的裂解物上样到阴离子交换柱，质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂进行选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除，用高盐缓冲液洗脱纯质粒DNA（参见"QIAGEN Plasmid Kit procedures"）。得到的DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后，离心收集。

Applications

QIAGEN Plasmid Kits纯化质粒DNA适合多种应用，如：

转染

克隆

PCR

体外转录

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