WOL-GG02-广州沃霖承接细胞培养实验室工程

广州沃霖承接细胞培养实验室工程

广州沃霖承接细胞培养实验室工程

广州沃霖承接细胞培养实验室工程

一、细胞培养实验室的设计与布局
 

细胞培养实验室应能进行六方面的工作：无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒自净处理、储藏。
1．无菌操作区
（1）无菌操作区：无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域，能与外界隔离，不能穿行或受其他干扰。
理想的无菌操作室应划为三部分：
a) 更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b) 缓冲间—―位于更衣间与操作间之间，目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。
c) 无菌操作间—―于无菌操作、细胞培养。其大小要适当，且其顶部不宜过高（不超过2.5m）以保证紫外线的有效自净效果；墙壁光滑*以便清洁和消毒。工作台安置不应靠墙壁，台面要光滑压塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。
（2）净化工作台：操作简单，安装方便，占用空间小且净化效果很好。一般细菌培养室使用的净化工作台主要有两种：a)侧流式或称垂直式 b)外流式或称水平层流式。
2．孵育区
本区对无菌的要求虽不比无菌区严格，但仍需清洁无尘，因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进行，后者费用高，一般实验室多采用孵箱进行工作。
3．制备区
在该区主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。
4．储藏区
主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等，此环境也需要清洁无尘。
5．清洗和消毒自净区
清洁和消毒自净区应与其他区域分开，主要进行所有细胞培养器皿的清洗、准备、消毒及三蒸水制备等工作。

二、细胞培养实验室基本技术
 

一）．洗涤技术 
1．洗涤液 
铬酸洗涤液是用重铬酸钾(K2Cr2O7)与硫酸(H2SO4)配制而成，可根据需要配制成弱、中、强三种。
弱 用重铬酸钾50g加入蒸馏水1L，加热溶化，冷却后再缓慢加入浓硫酸90ml。
中 用重铬酸钾50g加入蒸馏水100ml，加热溶化，冷却后再缓慢加入浓硫酸875ml。
强 与浓硫酸加热的同时缓慢加入磨碎的重铬酸钾，直到重铬酸钾达到饱和为止。一般浓硫酸1L加入重铬酸钾50g。
2．洗涤方法
玻璃器皿洗涤 
塑料用品洗涤 
金属用品洗涤

二）．自净、消毒技术
处理方法：物理自净 干热、湿热、射线处理、物理除菌 过滤、离心沉淀等
化学方法：消毒剂、抗菌素自净
1．培养基自净 
2．玻璃器皿自净 
3．金属用具自净 
4．接种室自净 
5．外植体自净 

几种常用消毒剂的效果比较